《基于环境DNA的内陆水体外来入侵水生动物调查与分布评估技术指南》HJ 1468-2026

本指南规定了采用基于探针法实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）的环境DNA技术，对河流、湖泊、水库、水田等内陆水体中外来入侵水生动物开展调查与分布评估的标准化程序和技术要求。本指南从资料收集、野外采样、实验室检测到区域分布等级划分，构建了一套完整的操作规范，旨在解决传统形态学调查方法耗时费力、灵敏度不足等问题，为各级生态环境管理部门提供统一、可比的技术依据。本指南明确规定了目标物种名单需依据国家发布的最新管理名录确定并同步更新，适用于对爬行动物、两栖动物、鱼类、甲壳动物及软体动物等多个类群的入侵状况进行系统性监测与评估。

调查采样与实验室检测流程

本指南详细规定了从资料收集、走访踏勘到水体及沉积物样本采集的全流程。在采样环节，针对河流、湖库、水田分别制定了差异化布点策略，要求采集具有代表性的水样或沉积物样本并低温保存运输。在实验室环节，规定了环境DNA提取、基于目标物种特异位点设计的引物探针验证、qPCR扩增及最低检测限的确定方法，并强调通过设置阴性、阳性对照及技术重复来确保数据可靠。

分布评估与质量控制体系

本指南建立了从单个样本到采样点再到评估区域的逐级评估方法。通过计算评估区域内阳性采样点所占比重，将外来入侵水生动物的分布评估等级进行量化划分。同时，本指南对野外采样、实验室操作及废弃物处理各环节均制定了严格的全程质量控制与质量保证措施，并以规范性附录的形式对引物特异性验证、野外与实验室质控要求做出硬性规定，确保评估结果的科学性与可重复性。