《海洋生物多样性监测规范 环境DNA宏条形码法》（征求意见稿）

本规范规定了利用环境DNA宏条形码法开展海洋生物多样性监测的技术要求、工作流程及质量保障措施。本规范适用于浮游植物、浮游动物、底栖生物、游泳动物和哺乳动物等类群的监测，覆盖从监测方案设计、本地参考数据库构建、样品采集与DNA提取，到宏条形码扩增测序、生物信息学分析及生物统计表生成的全链条操作。本规范强调通过统一的实验流程、严格的质量控制与质量保证手段，确保监测数据的科学性、可比性与可靠性，旨在推动环境DNA宏条形码技术在我国海洋生物多样性监测体系中的规范化应用。

监测方案与样品采集

本规范要求监测方案设计应遵循网格布设原则，综合考虑河口、近海、深远海及极地等不同生境特点，科学设定站点密度与水层选取。样品采集优先选择海水、沉积物等介质，每个站点每个水层至少采集3个生物重复样品，现场完成环境DNA富集或采取低温、固定剂保存措施，并详细填写采样记录，确保样品代表性和可追溯性。

实验室分析与生物信息学处理

本规范明确了DNA提取、宏条形码扩增、文库构建与高通量测序的实验操作规程，要求对每个样品设置阴性对照与阳性对照以监控污染和实验效率。生物信息学分析涵盖序列质控、OTU或ASV构建、物种注释及低丰度假阳性序列过滤，最终形成包含物种注释信息和序列丰度的标准化生物统计表，为多样性评估提供基础数据。

质量保障与全过程控制

本规范建立了贯穿外业内业全流程的质量控制与保证体系。外业阶段要求防止样品交叉污染，规范采样器具消毒与样品运输保存；内业阶段要求实验区域物理隔离、定期校准设备、严格执行操作规范。同时，通过计算假阳性率和假阴性率两项指标，量化评估监测结果的准确性，确保数据质量满足统一标准。